Produzione biotecnologica di peptidi antimicrobici
Oggi, la produzione biotecnologica di peptidi ricombinanti avviene prevalentemente nel batterio Escherichia coli, poiché questo sistema è stato ben descritto e sono disponibili numerosi strumenti genetici. Tuttavia, il suo utilizzo per la produzione di biofarmaci e additivi alimentari presenta alcuni importanti svantaggi. L 'E. coli è un batterio Gram-negativo che produce endotossine e non secerne i peptidi nel terreno di coltura, il che aumenta i costi di produzione. L'obiettivo di questo progetto è sviluppare una nuova piattaforma di espressione per la produzione biotecnologica di peptidi ricombinanti. Questa piattaforma si basa su un sistema di secrezione di peptidi naturalmente presente in un batterio Gram-positivo dell'acido lattico. Nella prima fase del progetto sono stati identificati e caratterizzati gli elementi genetici corrispondenti del batterio e nella seconda fase sono stati sviluppati gli strumenti genetici e biotecnologici per la sintesi di peptidi ricombinanti. Sono stati identificati i geni responsabili della secrezione naturale del peptide (un lantibiotico). L'operone comprende sei geni: un gene strutturale che codifica per il peptide secreto e geni che codificano le proteine per la modificazione, la secrezione e l'immunità dei ceppi di produzione verso il lantibiotico prodotto. Inoltre, è stato possibile determinare la regione del promotore con il sito di inizio della trascrizione e le sequenze putative di terminazione. Inoltre, è stato costruito un ceppo privo della capacità di sintetizzare il lantibiotico. Questa è una condizione importante per la successiva introduzione di vettori nella cellula per la produzione di peptidi ricombinanti. I primi esperimenti di crescita nel bioreattore hanno dato risultati promettenti. È stato possibile ottenere un'elevata densità cellulare in un breve periodo di tempo. Nell'ambito di questo progetto, abbiamo sviluppato e stabilito diversi nuovi metodi di biologia molecolare per ulteriori lavori sui batteri Gram-positivi nel nostro laboratorio. Uno di questi metodi è già stato pubblicato in un articolo di Promega Enotes.
2007 - 2009
Partner: HES-SO Valais (ITV)
Finanziamento: HES-SO e HES-SO Valais (ITV)
